詳細介紹MTT細胞增殖檢測試劑盒的操作步驟

　　MTT細胞增殖檢測試劑盒被廣泛應用于由誘導劑和抑制劑引起的細胞增殖活性變化的體外檢測，也可以用于一些生物活性因子的活性檢測、藥物篩選、細胞毒性測定等。
 

　　MTT細胞增殖檢測試劑盒含有足夠的試劑用于評估在96孔板中進行960次測定或在24孔板中進行192次測定。細胞可以被鍍，然后用影響增殖的化合物或藥劑。然后用增殖試劑檢測細胞，在活細胞中由黃色四唑MTT轉(zhuǎn)化為紫色福爾馬贊形式細胞還原酶。
 

　　MTT細胞增殖檢測試劑盒的操作步驟：
 

　　1、制備含有0.1-1.0x106的細胞懸液培養(yǎng)基中的細胞/ml。
 

　　2、將每孔100μL加入96孔細胞培養(yǎng)板或每孔500μL加入24孔細胞培養(yǎng)物中有或沒有待測化合物的板。細胞在37°C和5%培養(yǎng)24-96小時加濕培養(yǎng)箱中的二氧化碳。
 

　　3、加入10μlCytoSelect™MTT細胞增殖測定試劑，如果使用96-孔板，或24孔板的每個孔50µL。
 

　　4、在37°C和5%CO2下孵育平板3-4小時，直至可見紫色沉淀(細胞在光學顯微鏡下可以更精確地觀察到沉淀物)。
 

　　5、在96孔板的每孔中加入100μL去污劑溶液，或在24孔板的每孔中加入500μL去污劑溶液盤子。
 

　　6、在室溫下孵育2小時至避光過夜。
 

　　注意：在井中與洗滌劑溶液長時間孵育可能導致沉淀或渾濁可以增加背景。如果觀察到沉淀，將板在37℃加熱10-20分鐘并攪拌溶解沉淀物。
 

　　7、使用540-570nm作為主波長讀取吸光度。